Assinador Serpro não funciona inativo.

1) Abra o Assinador  > Configurações > Manutenção . E clique em "Reiniciar o Assinador"

Depois abra novamente o Assinador como administrador e clique em permitir exceção no antivírus e libera a instalação de certificados.

Depois no assinador vá em Configurações > Certificado em Arquivo, Escolha a forma de abertura do certificado. 

Abra o navegador novamente, Entre no link do assinador https://127.0.0.1:65156/ e clique em avançado e "Aceitar o Risco"

2) Colocar estes sites na lista de exeções do Java

http://cav.receita.fazenda.gov.br

http://emissores.sebrae.com.br

http://www.receita.fazenda.gov.br

https://assinadoc.estaleiro.serpro.gov.br/jws/

https://assinadoc.estaleiro.serpro.gov.br/jws/assinadoc-jws.jar

https://assinadoc.estaleiro.serpro.gov.br/jws/index.html

https://assinadoc.estaleiro.serpro.gov.br/server/jnlp

https://assinador.estaleiro.serpro.gov.br

https://cav.receita.fazenda.gov.br

https://cav.receita.fazenda.gov.br/ecac/Aplicacao.aspx?id=5020&origem=destaque

https://www.gov.br/receitafederal

https://www.receita.fazenda.gov.br

3) Definições de Segurança Avançada e assinale a opção Usar TLS 1.2

4) coloque este site na lista de sites confiaveis e no modo de exibição compatiblidade

https://www.receita.fazenda.gov.br

Só testar e ser feliz.